Forsøk og praktisk arbeid

Hvor

  • Inne

Passer for

  • ungdomstrinn 8-10
  • vg1
  • biologi 1

Tidsbruk

  • 45 min

Isoler ditt eget DNA

Dette forsøket viser hvordan vi kan isolere DNA fra våre egne celler (i munnhulen) og gjøre det synlig ved å felle det ut i etanol.

Hvis vi tar ut DNA fra en celle og strekker molekylet ut, vil det bli en tråd som er ca. 2 meter lang, men bare 2 nanometer (en milliondel av en millimeter) tykk. En slik tråd er umulig å se med det blotte øyet. Det er imidlertid mulig å se DNA molekylet dersom vi isolerer det fra mange tusen celler og samler det sammen i et nøste.

DNA

Fremgangsmåte

  1. Fyll et reagensrør med 3 ml vann og merk det med navnet ditt.
  2. Tygg innsiden av kinnene dine i 30 sekunder, for å få løs epitelceller.
  3. Ta vannet fra røret i munnen og skyll rundt for så å spytte vannet med cellematerialet tilbake i røret.
  4. Tilsett 2 ml lysisbuffer til røret, ta på korken, og vend røret opp og ned 5 ganger. Ikke rist!
  5. Tilsett 2 dråper protease-løsning og 2 dråper saltløsning til røret, og vend igjen røret opp og ned 5 ganger.
  6. Plasser røret i et 50 °C vannbad i 10 min.
  7. Hold røret i 45 graders vinkel og tilsett forsiktig ca. 10 ml iskald isopropanol ved å la det renne ned langs siden på røret.
  8. Rett opp røret og la det stå helt stille i 5 min.
  9. Sett på korken og vend røret langsomt opp og ned 5 ganger for at DNA, som nå har begynt å felle ut, skal klumpe seg sammen.
  10. Overfør DNA til et eppendorfrør - og du har isolert ditt eget DNA-molekyl!

Faglig forklaring

Lysisbuffer inneholder detergenten SDS (sodium dodecyl sulphate) som løser opp celle- og kjernemembranen som hovedsakelig består av lipider. Proteaser bryter ned proteinene som er festet til DNA-molekylet, samt andre proteiner i cellen. Saltet nøytraliserer negative ladninger på DNA og gjør molekylet mindre løselig. DNA har lav løselighet i alkohol, og vil derfor felle ut i alkohol-fasen.

Kommentarer/praktiske tips

Forsøket er basert på en protokoll utarbeidet av BioRad.

Firmaet BioRad selger et "Genes in a Bottle Kit " der alle løsningene til DNA-isoleringen er inkludert, i tillegg til et klassesett med halssmykker som elevene kan oppbevare sitt isolerte DNA i.

Aktuelle kompetansemål i læreplanen

Læreplan i naturfag

  • Etter 10. årstrinn
    • Mangfold i naturen
      • beskrive oppbygningen av dyre- og planteceller og forklare hovedtrekkene i fotosyntese og celleånding
  • Etter Vg1 - studieforberedende utdanningsprogram
    • Bioteknologi
      • forklare genetisk kode og hovedtrekkene i proteinsyntesen og gi eksempler på hvordan arv og miljø samspiller
  • Etter Vg3 - påbygging til generell studiekompetanse
    • Bioteknologi
      • forklare genetisk kode og hovedtrekkene i proteinsyntesen og gi eksempler på hvordan arv og miljø samspiller

Læreplan i biologi - programfag i studiespesialiserende utdanningsprogram

  • Biologi 1
    • Cellebiologi
      • gjere greie for oppbygginga av eukaryote celler og forklare kva for funksjonar ulike delar i cellene har

Materialer og utstyr

  • Reagensrør med kork
  • Vann
  • Engangs plastpipetter
  • Lysisbuffer (50 mM Tris, 1 % SDS)
  • Proteaseløsning (0,1 % Proteinase K)
  • Saltløsning (1 M NaCl)
  • Vannbad 50 °C
  • Iskald 90 % isopropanol
  • Eppendorfrør
Naturfaglig språk

Fagspesifikke begrep

  • DNA
    DNA utgjør arvematerialet i alle levende celler og styrer aktivitetene i cellen. DNA er bygd opp på samme måte i alle organismer. I bakterier ligger DNA som løse kveiler og som ringformede plasmider i cytosol. I plante- og dyreceller ligger DNA i cellekjernen, i mitokondrier og i kloroplaster.

Nettressurser